金龙胆草基因组DNA的提取及均匀设计优化RAPD反应体系

刘姗^1,2 胡洪利¹ 陈惠^1*

（1. 四川农业大学生命科学与理学院，四川 雅安 625014；2.攀枝花学院生物与化学工程学院，四川 攀枝花617000）

摘要:目的　探索金龙胆草DNA的提取并利用均匀设计方法对其RAPD反应体系进行优化。方法　比较改良SDS法和试剂盒提取法提取的DNA效果，通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确立适合实验操作的最佳方法；利用两次均匀设计实验确立最佳PCR反应体系，并考察退火温度对扩增效果的影响。结果　改良SDS法较适合金龙胆草基因组DNA提取，25 μL体系中内含10xTaq reaction Buffer 2μL、Mg²⁺2.5 mmol/L，dNTPs 4.5mmol/L，Primer 3.5μmol/L，DNA模板60 ng，Taq酶1.5 U，退火温度为38.9 ℃。结论　改良SDS法及金龙胆草的RAPD反应体系可以用于金龙胆草的DNA分析。

关键词：金龙胆草；基因组DNA；均匀设计；RAPD