伊血安胶囊与伊血安颗粒疗效的比较研究
周江煜1，戴航1，王礼蓉1，韦宏官2，李爱媛1，周芳1，侯小涛1*
（1.广西中医学院，广西 南宁 530001 2.广西万寿堂药业有限公司，广西 南宁 530219）
摘要：目的 观察伊血安（滇桂艾纳香、益母草、延胡索、甘草等）胶囊和颗粒之间在止血、止痛及活血化瘀作用疗效比较。方法 1.采用玻片法和玻管法观察伊血安凝血作用； 2.采用缩宫素诱发小鼠痛经模型，观察伊血安镇痛作用；3.采用小鼠皮下血肿吸收实验观察伊血安活血化瘀作用。结果 1. 凝血实验结果显示，伊血安颗粒大剂量组、伊血安胶囊大、中剂量组与空白对照组比较有显著性差异，P<0.01或P<0.05，两者比较伊血安胶囊止血作用优于伊血安颗粒；2. 缩宫素诱发小鼠痛经的实验结果显示，伊血安颗粒小剂量组、伊血安胶囊大剂量组与空白对照组比较有显著性差异，P<0.05或P<0.01，两者比较伊血安胶囊镇痛作用优于伊血安颗粒；3.小鼠皮下血肿结果显示，伊血安颗粒、伊血安胶囊各剂量组分别与空白对照组比较有显著性差异，P<0.05或P<0.01。结论 伊血安颗粒、伊血安胶囊对止血、止痛及活血化瘀有一定的影响。伊血安胶囊止血、止痛作用优于颗粒；活血化瘀作用两者比较无统计学差异。
关键词：伊血安颗粒；伊血安胶囊；止血；止痛；活血化瘀
Comparative study on therapeutic effect between Yixue’an Granule and Yixue’an Capsule
ZHOU Jiang-yu1，DAI Hang1，WEI Hong-guan2, WANG Li-rong1，LI Ai-yuan1，ZHOU Fang1, HOU Xiao-tao1*
(1.Guangxi Traditional Chinese Medical University, Nanning 530001, China; 2.Guangxi Medictop pharmaceutical co. LTD, Nanning 530219, China)
ABSTRACT: AIM To compare blood-stanching, pain-relief and blood-quickening stasis-dissipating effect between the capsule and the granule of Yixue’an (Blumeae ripariae Herba, Leonuri Herba, Corydalis Rhizoma, Glycyrrhizae Radix et Rhizoma, etc.). METHODS The sliding method and glass tube were used to observe the coagulation of both preparations. Mice models for oxytocin-induced dysmenorrhea and for subcutaneous hematoma were applied in experimental observation of pain-relief and blood-quickening stasis-dissipating, respectively. RESULTS 1.The coagulation results showed that it had significant difference by comparing the large dose group of Yixue’an Granule, the large dose group of Yixue’an Capsule and the middle dose group of Yixue’an Capsule with the control group, P<0.01 or P<0.05. The blood-stanching of
Yixue’an Capsule was better than that of Yixue’an Granule. 2. The results of dysmenorrhea induced by oxytocin showed that it had significant difference by comparing the small dose group of Yixue’an Granule and the large dose group of Yixue’an Capsule with the control group, P<0.05 or P<0.01. The pain relief of Yixue’an Capsule was better than that of Yixue’an Granule. 3. The results of subcutaneous hematoma absorption experiments showed that it had significant difference by comparing all kinds of dose group of Yixue’an Granule and all kinds of dose group of Yixue’an Capsule in the control group, P<0.05 or P<0.01. CONCLUSION The Yixue’an Granule and Yixue’an Capsule have impact on the blood-stanching, pain-relief and blood-quickening. The blood-stanching and pain-relief of Yixue’an Capsule is better than that of Yixue’an Granule. The blood-quickening of two have no significant difference.
KEY WORDS: Yixue’an Granule; Yixue’an Capsule; blood-stanching; pain-relief; blood-quickening
伊血安颗粒[1]主要成分为滇桂艾纳香、益母草、延胡索、甘草等。具有活血止血、行气止痛等功效。临床上用于产后恶露不绝[2]，人工流产后子宫出血[3]不净，中医辩证属血瘀证者[4]。为更好的发挥疗效以及方便给药，在伊血安颗粒的基础上进行了伊血安胶囊的研制。本实验对伊血安颗粒与伊血安胶囊的止血、止痛及活血化瘀作用进行比较研究，报道如下。
1 材料
1.1 供试品
伊血安颗粒、伊血安胶囊（每粒胶囊含提取物0.3g）由广西万寿堂药业有限公司提供，伊血安颗粒批号：2011.03.17（28g生药/包，取3包）；伊血安胶囊批号：2010.1.13（9.33g生药/粒,取9粒）。供试品以纯净水配成高、中、低不同的浓度灌胃（ig）给药。
1.2 动物
昆明种小白鼠，由广西中医学院实验动物中心提供，清洁级（CL），动物许可证号：SYXK桂2010-0001。
1.3 试剂及药品
云南白药（云南白药集团股份有限公司，批号：20080629）；缩宫素注射液（上海禾丰制药有限公司，批号：080708）；硫酸罗通定注射液（广东省博罗先锋药业集团有限公司，批号：900009）；注射用青霉素钠（哈药集团制药总厂，批号：A100805410）；无水氯化钙（成都科龙化工试剂，AR，批号：20100330）。
1.4 仪器
DT-100型电子天平（美国双杰兄弟（集团）有限公司）；EL204型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；120 mm×0.9～1.1mm玻璃毛细管（四川成都—华西医科大学仪器厂）。
2 实验方法与结果
2.1 对小鼠凝血时间的影响
2.1.1 玻片法[5] 取健康昆明种小鼠80只，体重20±2g，雌雄兼用，随机分为8组，10只/组，即空白对照组（给予等容积纯净水）、阳性组（云南白药粉2g/kg）、伊血安颗粒 (42、21、10.5g生药/kg)组、伊血安胶囊(42、21、10.5g生药/kg)组。灌胃（ig）给药，容量为30mL/kg。给药1次，药后60分钟测定凝血时间[6]。用内径为0.9～1.1mm，厚度为0.1～0.15mm毛细玻璃管从小鼠眼内眦部刺入，血液通过毛细玻璃管滴于载玻片上，立即用秒表记时，1分钟内每隔30秒钟用清洁针头自血滴边缘向里轻轻挑动一次，并观察有无血丝形成，以后每隔15秒钟挑动一次。从采血开始至挑起血丝止，所历时间即为凝血时间。实验数据经统计学分析，进行两组间t检验。结果见表1。
表1 对小鼠凝血时间（玻片法）的影响（
，n=10）
Tab 1 The effect on the coagulation time (Slide Method) in mice（
，n=10）
|
组 别 |
剂量 （g/kg） |
玻片法 （min） |
缩短率 （%） |
|
空白组 |
— |
3.45±0.88 |
— |
|
云南白药 |
2.0 |
2.54±0.88* |
26.38 |
|
伊血安颗粒 |
42.0 |
2.66±0.74* |
22.90 |
|
|
21.0 |
3.25±1.79 |
5.80 |
|
|
10.5 |
2.77±0.75 |
19.71 |
|
伊血安胶囊 |
42.0 |
2.31±1.18* |
33.04 |
|
|
21.0 |
2.22±0.63** |
35.65 |
|
|
10.5 |
2.94±0.80 |
14.78 |
注：与对照组比较：*P<0.05；**P<0.01。下同。
Note:Comparing with the control group: *P<0.05；**P<0.01,the same blow.
表1结果显示，伊血安颗粒大剂量组、伊血安胶囊大、中剂量组与空白对照组比较有显著性差异，P<0.01或P<0.05，表明伊血安颗粒、伊血安胶囊有缩短小鼠凝血时间的作用。
2.1.2 玻管法[5] 实验分组及给药同载玻片法。各组小鼠分别于药后60分钟测定凝血时间。用直径为用内径为0.9～1.1mm，厚度为0.1～0.15mm，长度10cm
毛细玻璃管刺入小鼠眼内眦球后静脉丛，血液流进毛细玻璃管内，立即用秒表记时，1分钟内每隔30秒钟折断玻璃管一次，观察折断玻璃管处有无血丝出现，以后每隔15秒钟折断玻璃管一次，直至玻璃管内出现血丝即为凝血时间，所历时时间为凝血时间。实验数据经统计学分析，进行两组间t检验。结果见表2。
表2 对小鼠凝血时间（玻管法）的影响（
，n=10）
Tab 2 The effect on the coagulation time (Glass-tube Method) in mice（
，n=10）
|
组 别 |
剂量 （g/kg） |
玻管法 （min） |
缩短率 （%） |
|
空白组 |
— |
3.11±0.69 |
— |
|
云南白药 |
2.0 |
2.89±0.48 |
7.07 |
|
伊血安颗粒 |
42.0 |
3.00±0.52 |
3.54 |
|
|
21.0 |
2.91±1.14 |
6.43 |
|
|
10.5 |
2.99±0.50 |
3.86 |
|
伊血安胶囊 |
42.0 |
2.87±0.80 |
7.72 |
|
|
21.0 |
2.49±0.46* |
19.94 |
|
|
10.5 |
3.10±0.68 |
0.32 |
表2结果显示，伊血安胶囊中剂量组与空白对照组比较有显著性差异P<0.05，表明伊血安胶囊有缩短小鼠凝血时间的作用；而伊血安颗粒有缩短小鼠凝血时间趋势但无统计学意义。
2.2 对缩宫素诱发小鼠痛经的影响[7-9]
取♀性小鼠96只（体重25～30g），随机分为8组，10只/组，即空白对照组（给予等容积纯净水）、阳性组（罗通定40mg/kg）、伊血安颗粒 (42、21、10.5g生药/kg)组、伊血安胶囊(42、21、10.5g生药/kg)组。ig，1次/天，给药容量为30mL/ kg，连续5天。末次给药后1小时，每鼠均ip缩宫素2.5u/只，以诱发宫缩[10]痛。记录各鼠ip缩宫素后15分钟内的扭体[11]次数，用药组与空白对照组比较，进行两组间t检验。结果见表3。
表3 对缩宫素诱发小鼠痛经的影响（
，n=12）
Tab 3 The effect on dysmenorrhea induced by oxytocin in mice（
，n=12）
|
组 别 |
剂量 （g/kg） |
扭体潜伏 （min） |
扭体次数 （15min内） |
抑制率 （%） |
|
空白组 |
— |
2.33±2.95 |
5.67±2.90 |
— |
|
云南白药 |
2.0 |
7.07±6.54* |
1.67±1.50** |
70.55 |
|
伊血安颗粒剂 |
42.0 |
4.54±5.07 |
4.08±2.35 |
28.04 |
|
|
21.0 |
3.91±5.88 |
5.25±2.38 |
7.41 |
|
|
10.5 |
6.93±6.85* |
3.17±2.69* |
44.09 |
|
伊血安胶囊 |
42.0 |
6.36±6.04* |
2.08±1.68** |
63.32 |
|
|
21.0 |
3.95±5.12 |
4.42±3.09 |
22.05 |
|
|
10.5 |
2.50±2.28 |
6.33±2.39 |
-11.64 |
表3结果显示，伊血安颗粒小剂量组、伊血安胶囊大剂量组与空白对照组比较有显著性差异，P<0.05或P<0.01，提示伊血安颗粒、伊血安胶囊对缩宫素
诱发小鼠痛经均有一定的镇痛作用，两者比较伊血安胶囊作用优于伊血安颗粒。
2.3 对小鼠皮下血肿吸收的影响[12]
取健康昆明种小鼠88只，体重25～30g， 雌雄兼用，按体重分笼，于给药前作皮下血肿造型[4]：每鼠一侧眼眶取血0.5mL，加入含1万单位青霉素的0.1mol/L CaCl2 溶液0.1mL混匀，立即注入自身颈背部皮下，造成皮下血肿。造模后随机分为8组，11只/组，即空白对照组（给予等容积纯净水）、阳性组（云南白药2g/kg）、伊血安颗粒 (42、21、10.5g生药/kg)组、伊血安胶囊(42、21、10.5g生药/kg)组。ig，1次/天，连续给药5天，于造模后第7天处死，分离皮下血肿包块，电子天平称重(湿重)，并烘干(60℃, 15min)，称干重。实验数据进行统计学分析，进行两组间t检验。结果见表4。
表4 对小鼠皮下血肿的影响（
）
Tab 4 The effect on ecchymoma in mice（
）
|
组 别 |
动物数 （n） |
剂量 （g/kg） |
血块重量（mg） | |
|
湿重 |
干重 | |||
|
空白组 |
10 |
— |
125.0±53.48 |
71.37±39.07 |
|
云南白药 |
10 |
2.0 |
53.06±32.30** |
27.19±19.63** |
|
伊血安颗粒剂 |
10 |
42.0 |
36.68±22.58** |
20.32±15.78** |
|
|
11 |
21.0 |
41.15±22.10** |
16.26±12.17** |
|
|
11 |
10.5 |
45.88±21.37** |
22.70±13.02** |
|
伊血安胶囊 |
10 |
42.0 |
59.27±35.08** |
29.06±20.72** |
|
|
10 |
21.0 |
57.35±25.55** |
27.79±15.65** |
|
|
10 |
10.5 |
39.34±20.11** |
18.07±11.00** |
表4结果显示，伊血安颗粒、伊血安胶囊各剂量组分别与空白对照组比较小鼠皮下血肿（湿重、干重）均显著性差异，P<0.01，伊血安颗粒、伊血安胶囊具有活血化瘀的作用。
3 讨论
伊血安颗粒为广西瑶族民间专治妇科血症的验方，以瑶药滇桂艾纳香为君药，配以益母草、延胡索、甘草等，用于血瘀证之产后恶露不绝、流产后子宫出血不净的治疗，为广西万寿堂药业有限公司研制开发的3类中药新药。伊血安胶囊是在伊血安颗粒的基础上，以相同处方，对有效部位进行提取浓缩后研制而成。
本实验以伊血安颗粒、伊血安胶囊ig给药进行试验，实验结果表明伊血安颗粒、伊血安胶囊二者都有缩短小鼠凝血时间的作用；对缩宫素诱发小鼠痛经模型具有一定的镇痛作用；对小鼠皮下血肿的吸收有明显的影响。其中玻片法结果显示，伊血安颗粒大剂量组与空白组比较P<0.05，伊血安胶囊大、中剂量组与空白对照组比较P<0.05和P<0.01。玻管法结果显示，伊血安颗粒有缩短凝血时间的趋势，但无统计学意义，而伊血安胶囊中剂量组与空白对照组比较P<0.05。说明两者比较伊血安胶囊止血作用优于伊血安颗粒。此外，伊血安颗粒实验结果未呈现量效关系，可能与其含糖量较高，在高浓度时药物在动物体内吸收会受到一定影响有关。
本实验通过对伊血安胶囊及其原制剂伊血安颗粒进行比较研究，证实二者均有止血、止痛和活血化瘀作用，且伊血安胶囊的止血作用优于伊血安颗粒，为临床使用伊血安胶囊治疗妇科血症提供了有效的实验依据。
参考文献：
[1]冉先德. 中华药海[M]. 哈尔滨: 哈尔滨出版社, 1993: 2095.
[2]林寒梅, 贺恒祯, 庞秋华. 伊血安颗粒治疗血瘀型产后恶露不绝临床观察[J]. 新中医, 2010, 42(6): 48-49.
[3]张华. 伊血安颗粒促进产后子宫复旧的临床观察[J]. 河南中医, 2011, 31(3): 284-285.
[4]侯小涛, 慕丽群, 周江煜, 等. 伊血安颗粒的主要药效学实验研究[J]. 中国实验方剂学杂志, 2010, 16(1): 109-112.
[5]陈奇主编. 中药药理研究方法学[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2006年1月第二版第5次印刷, 481.
[6]刘贺之, 庞健, 王增岑. 菊三七止血作用的研究[J]. 中国医院药学杂志, 1985, 5(7): 4.
[7]王永汉, 王民, 柳树芳, 等. 痛经灵治疗原发性痛经的药理研究[J]. 中成药, 1986, (9): 23.
[8]吕清文, 丛雅勤. 延胡索药理作用及临床应用浅议[J]. 内蒙古中医药, 2005, 24(1): 26.
[9]曹旦华, 高珍, 寇俊萍, 等. 2种当归芍药散提取物的镇痛活性与化学成分差异分析[J]. 中国实验方剂学杂志, 2010 , 16(16): 89-91.
[10]陈绮, 王洁, 刘桂敏, 等. 贯众抗生育有效部分的药理研究[J]. 天津医药, 1980 , (8): 488.
[11]徐叔云, 陈修, 卞如濂, 等. 药理实验方法学（第2版）[M]. 人民卫生出版社, 1994: 838, 1121, 700.
[12]姬军风, 孔彬彬. 肿痛消颗粒治疗急性软组织损伤的实验研究[J]. 现代中医药, 2009, 29 (3): 47-48.
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